A device that allows observation of a magnified image of an object through an optical system. Microscope opticsIt consists of an objective lens with a short focal length and an eyepiece lens with a focal length of several centimeters. The objective lens produces an inverted real image of an object slightly outside the focal point near the front focal point of the eyepiece lens. The eyepiece lens, like a magnifying glass, magnifies the image produced by the objective lens for observation. The focal lengths of the objective lens and eyepiece lens are f o and f e , respectively, the amount called the optical tube length of the microscope is Δ , and the clear vision distance of the naked eye is 250 mm. The magnification of the objective lens is given by Δ /f o , and the magnification of the eyepiece lens is given by 250/f e . Therefore, the total magnification of the microscope is given by 250 Δ /f o f e . Δ is close to what is called the mechanical tube length. The objective lens plays an important role in determining the performance of the microscope. In addition to magnification, the performance of a microscope is governed by a quantity called the numerical aperture. The larger the numerical aperture, the greater the objective lens's ability to resolve minute parts (resolution). Furthermore, to achieve this level of resolution, it is necessary to properly correct aberrations. To improve the image at the center, it is necessary to correct aberrations called spherical aberration and coma aberration, and in order to do so, a condition called the sine condition must be satisfied. In addition, an aberration called chromatic aberration must be corrected. Objective lenses with chromatic aberration corrected are called apochromats. With high magnification objective lenses, chromatic aberration needs to be corrected even better, and such objective lenses are called apochromats. In addition, in the case of high-magnification objective lenses, the space between the specimen and the front of the objective lens is filled with a suitable liquid to correct aberrations and increase resolution. This is called the immersion method, and the objective lens made in this way is called an immersion objective lens. An illumination device is required to send the appropriate light to the specimen. For this reason, low-magnification microscopes place a plane or concave reflector under the specimen stage to form an image of a uniformly bright object, such as the sky or a window, on the specimen surface. High-magnification microscopes have an optical system called a condenser under the stage, which illuminates the specimen surface with a beam of light with a spread that matches the numerical aperture of the objective lens. [Kazuo Miyake] Various types of microscopesMicroscopes are classified according to their purpose, the wavelength of light they use, the principles they employ, and so on. The most common microscope is the biological microscope, which is used to observe transparent specimens such as living organisms. Light is passed through the stage from below, and the difference in absorption in each part of the specimen creates a contrast between light and dark in the image. Opaque specimens such as metals must be observed using reflected light, and for this reason, metallurgical microscopes equipped with vertical epi-illumination devices that send illumination light from the microscope side are used. Specimens that do not create contrast between light and dark due to differences in absorption or reflectance cannot be observed with the microscopes mentioned above. In the case of such specimens, observation is possible by using the phase contrast method, which converts the phase difference caused by differences in refractive index or surface unevenness into a contrast between light and dark. This microscope is called a phase contrast microscope. It has the advantage that it is not necessary to stain the specimen, and living organisms can be observed. A dark-field microscope is a microscope that applies illumination light from the side, prevents light that travels straight through the objective lens, and observes only the light scattered by the specimen. There is also an ultramicroscope that detects only the presence of particles smaller than the limit of resolution using scattered light from dark-field illumination. Classification by wavelength includes ultraviolet microscopes, which use ultraviolet light to improve resolution and produce contrast through absorption that does not exist with visible light. There are also infrared microscopes that send infrared light to samples in infrared spectroscopy. Electron microscopes, which use electron beams instead of light, have been developed in recent years. They correspond to the refraction of light using lenses, and form an image by bending the path of electrons using the action of electric and magnetic fields. Since the wavelength of electron beams is much shorter than that of light, they can achieve high magnification and high resolution. However, electron beams do not pass through air, so the sample must be held in a vacuum chamber. They have different purposes of use from optical microscopes, but they complement each other. For convenience of observation, there are some microscopes in which the light beam is split into two by a prism at the observation section, allowing observation with both eyes; these are called binocular microscopes. [Kazuo Miyake] Microscope and Biology The microscope, which is said to have been invented around 1590 by Dutch spectacles makers Hans and Zacharias Janssen, father and son, progressed in close connection with the telescope, which was invented a short time later and dramatically advanced astronomy, and led to groundbreaking developments in biology. The microscope of Dutch naturalist Leeuwenhoek was nothing more than a magnifying glass made from polished glass beads, but he used it to describe red blood cells, sperm, hydra, rotifers, and other organisms, becoming the founder of histology. It was British physicist and astronomer R. Hooke who discovered cells in 1665 using a compound microscope with combined lenses, but his microscope had severe aberrations and did not match the performance of Leeuwenhoek's microscope. Optical microscopes were subsequently improved and their resolving power increased. However, research by German physicist and astronomer E. Abbe of Zeiss revealed in 1887 that there was a limit to resolving power. According to his theory, The general method for observing biological materials is to (1) fix the target tissue in a fixative, (2) harden it uniformly using an embedding agent such as paraffin or celloidin, (3) slice it into thin slices using a microtome, attach them to glass slides, and (4) stain it with a dye appropriate for the purpose. The result is a preparation (microscope specimen), which is observed under a microscope. In normal staining, the tissue is directly stained with an appropriate combination of acidic and basic dyes, but to examine the distribution of specific substances or enzymes within tissues or cells, a method is used to color the products of chemical reactions. This is called histochemistry or cytochemistry. Both normal staining and histochemistry look at the colors applied to dead tissue, but to observe tissues and cells in their live state without coloring them, a phase contrast microscope or a differential interference contrast microscope, which largely compensates for its shortcomings, is used. This is a microscope that has a mechanism that converts the slight differences in refractive index between parts of transparent tissue into differences in light and dark.The phase contrast microscope was completed in 1935 by the Dutch physicist Zernike with the cooperation of Zeiss. Electron microscopes use electron beams instead of light beams. Because the wavelength of electron beams is short, about 0.05 angstroms, they can easily exceed the limit of resolution of optical microscopes. The principle of electron microscopes is very similar to that of optical microscopes. When an accelerating voltage is applied to a heated filament, thermal electrons fly out toward the anode. This electron beam travels through a hole in the center of the anode, passes through a focusing lens made of electromagnets, and hits the sample. After passing through the sample, it is refracted by the objective lens and projection lens, and an enlarged image is formed on the fluorescent screen. If there is a dense part in the sample, the electron beam scatters and creates a dark image. Parts that appear dark are said to have a high electron density. To observe thick samples or bacteria in their entirety, ultra-high voltage electron microscopes with a high accelerating voltage are used. These electron microscopes are called transmission electron microscopes. In contrast to this, scanning electron microscopes were developed to observe the three-dimensional structure of cells and the surface of objects. When a sample is scanned with an electron beam, secondary electrons emitted from the sample are detected and scanned on a cathode ray tube to create a light and dark image. [Seiichiro Kawashima] How to use a biological microscopeA biological microscope is an optical microscope that uses visible light with a wavelength of 550 millimicrons. It has an objective lens (objective mirror) and an eyepiece lens (eyepiece) attached to the top and bottom of the tube. It also has a stage (mounting table) that holds the specimen, and an illumination system that illuminates the specimen, including a condenser, aperture, reflector, light source (if the light source is built-in), focus adjustment mechanism, mirror base, and mirror column (arm). Biological microscopes can be broadly divided into two types: those with a vertically movable tube and those with a vertically movable stage. In both types, the most important objective lenses are generally used at 4x, 10x, 20x, 40x, and 60x (all dry systems), and 100x (oil immersion system). Meanwhile, eyepieces that magnify the image of the objective lens come in 5x, 10x, 15x, and 20x magnifications. For microscope observations, choose a clean, dry, and dust-free location. If using natural light as a light source, it is best to use sunlight from a north-facing window. Fluorescent lights are suitable as artificial light sources, but it is more effective if a dedicated lighting fixture is provided. Built-in light source types use an iodine light source, which is bright and excellent. The microscope operations are performed in the following order: (1) Decide the magnification. First, focus with a low-magnification lens, then change to a higher magnification if necessary. Raise the telescope tube high and attach the eyepiece lens, then the objective lens. (2) Adjust the telescope tube to the standard tube length (leave the fixed telescope tube as it is). (3) Look through the eyepiece and move the reflector until the field of view is brightest and the brightness is uniform. (4) Place the specimen on the stage and secure it so that it is in the center of the hole in the stage. (5) When adjusting the focus, move the objective lens closer while checking the distance between it and the specimen from the side, then use the coarse and fine adjustment handles to accurately adjust the focus while looking through the eyepiece. [Takehiko Hayashi] MicrographPhotomicrographs play an important role in scientific and technological fields where records must be made for the study, inspection, and identification of minute structures. There are optical photomicrographs using optical microscopes and electron photomicrographs using electron microscopes, and depending on the type of microscope, type of specimen, lighting method, etc., there are biological photomicrographs, metallographic photomicrographs, scanning photomicrographs, etc. Generally, it is relatively easy to take microscopic photographs using a single-lens reflex camera with a dedicated adapter. A camera with a built-in TTL exposure meter is suitable. More accurately, film surface metering (TTLAE) can be used. A slide projector or a dedicated light source is used as the light source. In either case, care must be taken to align the optical axis with the microscope so that there is no unevenness in the illumination. For monochrome (black and white) photography, use a film with fine grain. Good results can be obtained by using a green filter as the light source. For color photography, when using reversal type (for slides) film, for daylight (daylight), the brightness of the light source should be determined in advance, and color temperature conversion filters (light balancing filters) should be tested by changing the shutter speed to select the filter that suits the purpose. Tungsten light is often used as a light source for binocular stereo microscopes with incident and oblique illumination. In this case, too, the brightness of the light source should be determined in advance, and a shutter test should be performed in advance to select the appropriate filter. It is preferable that the specimen has clear contrast between light and dark, is flat, and for color, has a high staining density. It is important to keep in mind that microscopic photographs have little contrast. When photographing biological specimens (such as microorganisms) without staining, it is important to know how to freeze the movement and how to narrow the aperture of the microscope. It is also effective to attach a motor drive to the camera. [Takehiko Hayashi] "Polarizing Microscope" by Tsuboi Seitaro (1959, Iwanami Shoten)" ▽ "How to Use a Microscope" by Tanaka Katsumi (1968, Shokabo) ▽ "The Basics of Biological Microscopes" by Yagishi Kanji (1973, Baifukan) ▽ "The Basics of Microscope Observation (Microscope Observation Series 1)" edited by Inoue Tsutomu and written by Hayashi Takehiko (1980, Chijin Shokan)" [Reference items] | | | |In a microscope, the magnified image of an object is produced by an objective lens with a short focal length, and then further magnified by an eyepiece that acts like a magnifying glass . Microscope optical path diagram [Direction of illumination] [Transmitted illumination] Observe the light that passes through a transparent or translucent specimen -- Normal microscope, polarizing microscope, ultraviolet microscope, phase contrast microscope, fluorescent microscope, interference microscope [Epi-illumination (including oblique illumination)] Illuminate the specimen from above and observe the reflected light. Oblique illumination is used in biological microscopes at low magnification -- Metallurgical microscope, interference microscope, tool microscope, oblique illumination biological microscope (when photographing the entire specimen without a cover glass) [Illumination method] [Bright-field illumination] There is transmitted light and epi-illumination, and the light that passes through the center is used -- General observation [Dark-field illumination] The illumination light does not enter the objective lens directly, and illumination is only provided by the scattered light that hits the specimen -- Microscopy of bacteria and particles [Oblique illumination] Illuminate with a light beam only from a certain oblique direction -- Used when the outline is difficult to capture with bright-field illumination [Phase contrast illumination] Observe by changing the difference in refractive index of transparent or unstained biological specimens into a difference in interference -- Observation of transparent specimens, etc. ©Shogakukan "> Classification of microscopes by illumination method Source: Shogakukan Encyclopedia Nipponica About Encyclopedia Nipponica Information | Legend |
光学系によって物体の拡大像の観察を可能にする装置。 顕微鏡の光学系焦点距離が短い対物レンズと、焦点距離が数センチメートルの接眼レンズからなる。対物レンズは、焦点よりすこし外側にある物体の倒立実像を接眼レンズの前側焦点近くに生ずる。接眼レンズは、虫めがねのように、対物レンズによって生じた像を拡大して観察させる。対物レンズ、接眼レンズの焦点距離をそれぞれfo、feとし、顕微鏡の光学的筒長といわれる量をΔ、肉眼の明視の距離を250ミリメートルとする。対物レンズの倍率はΔ/foで、接眼レンズの倍率は250/feで与えられる。したがって顕微鏡の総合倍率は250Δ/fofeで与えられる。Δは機械的筒長といわれるものに近い。対物レンズは顕微鏡の性能を左右する重要な働きをする。顕微鏡の性能は倍率のほかに開口数とよばれる量によって支配される。開口数が大きいほど、対物レンズが微小部分を分解する能力(分解能)が大きくなる。またこの分解能を発揮するためには、収差をよく補正することが必要である。中心部の像をよくするには、球面収差、コマ収差とよばれる収差を補正する必要があり、そのためには正弦条件とよばれる条件が満たされる必要がある。また色収差という収差を補正しなければならない。色収差を補正した対物レンズはアポクロマートとよばれる。高倍率の対物レンズではもっとよく色収差を補正することが必要で、そのような対物レンズはアポクロマートとよばれる。 また高倍率の対物レンズでは、収差補正および分解能をあげる目的から、観察試料と対物レンズの前面の間の空間を適当な液体で満たす。これを液浸法といい、このようにしてつくられた対物レンズを液浸対物レンズという。試料に適当な光を送り込むために照明装置を必要とする。このため、低倍率の顕微鏡では、試料ステージの下に平面鏡か凹面鏡の反射鏡を置き、天空や窓などの一様な明るさのものを試料面に結像する。高倍率の顕微鏡では、コンデンサーとよばれる光学系をステージの下に備えており、試料面を対物レンズの開口数に見合う広がりの光線束で照らすようになっている。 [三宅和夫] 顕微鏡のいろいろ顕微鏡は、その用途、使用される光の波長、利用される原理などにより分類される。 もっとも普通の顕微鏡は、生物などの透明試料を観察するための生物顕微鏡である。光をステージの下から透過させ、試料各部の吸収の差により像に明暗のコントラストを生ずる。金属のように不透明な試料は、反射光によって観察する必要があり、そのため顕微鏡の側から照明光を送り込む垂直落射照明装置を備えた金属顕微鏡が用いられる。吸収や反射率の差による明暗のコントラストを生じない試料は、前述の顕微鏡では観察できない。このような試料の場合には、屈折率の差や表面の凹凸によって生じた位相差を明暗のコントラストに転じる位相差法を用いることにより、観察が可能となる。この顕微鏡を位相差顕微鏡という。試料を染色する必要がなく、生物を生きたまま観察できる利点がある。照明光を側方から当て、直進する光は対物レンズに入らないようにし、試料により散乱された光だけで観察を行うのを暗視野顕微鏡という。また分解能の限界よりも小さい粒子を、暗視野照明による散乱光によってその存在のみを検知する限外顕微鏡がある。 使用する波長による分類としては紫外線顕微鏡があり、紫外線を使用することにより分解能を高め、また可視光線では存在しない吸収によりコントラストを生ずることができる。ほかに赤外線分光器の試料に赤外線を送り込むための赤外線顕微鏡がある。光でなく電子線を使用する電子顕微鏡が近年発達した。レンズで光を屈折させるのに対応し、電界・磁界の作用により電子の進路を曲げて像を結ばせる。電子線の波長が光に比べてはるかに短いので、高倍率、高分解能を得ることができる。しかし電子線は空気を透過しないので、試料を真空槽中に保持しなくてはならない。光学顕微鏡とは使用目的が異なり、互いに相補うものである。観察に便利なため、観察部で光線をプリズムによって二つに分け、両眼で観察するようにしたものがあり、双眼顕微鏡という。 [三宅和夫] 顕微鏡と生物学1590年ごろ、オランダの眼鏡職人ハンスとザカリアス・ヤンセン父子によって発明されたといわれる顕微鏡は、そのしばらくのちに発明され天文学を飛躍的に発達させた望遠鏡と深く関連して進歩し、生物学を画期的に発展させた。オランダの博物学者レーウェンフックの顕微鏡は、ガラス玉を磨いてつくった虫めがね以上ではない簡単なものであったが、彼はこれを用いて赤血球、精子、ヒドラ、ワムシなどを記載し、組織学の創始者となった。組合せレンズの複式顕微鏡を用いて1665年に細胞の発見者となったのは、イギリスの物理学・天文学者のR・フックであるが、彼の顕微鏡は収差がひどく、レーウェンフックの顕微鏡に性能が及ばなかった。光学顕微鏡はその後改良され解像力を増していった。しかし、ドイツのツァイス社の物理学・天文学者であるE・アッベの研究によって、解像力には限界のあることが1887年に明らかにされた。彼の理論によれば、 生物材料を観察するための一般的方法は、対象とする組織を(1)固定液で固定し、(2)パラフィンやセロイジンなどの包埋剤を用いて一様に硬化させ、(3)ミクロトームで薄切りして切片をつくり、スライドガラスに張り付け、(4)目的にあった色素で染色する。こうしてできあがったものがプレパラート(顕微鏡標本)で、これを顕微鏡で観察する。通常の染色では、酸性色素と塩基性色素を適当に組み合わせて直接に組織を染めるが、組織や細胞内にある特定の物質や酵素の分布を調べるには、化学反応の産物を着色させる方法による。これを組織化学または細胞化学という。通常染色も組織化学も死んだ組織につけた色を見るものであるが、組織や細胞を生(なま)の状態で着色せずに観察するには、位相差顕微鏡、またはその欠点をほとんど補った微分干渉顕微鏡を用いる。これは透明な組織でも屈折率が部分によりわずかに異なるのを明暗の差に変える機構をもった顕微鏡で、位相差顕微鏡はオランダの物理学者ゼルニケがツァイス社の協力により1935年に完成した。 電子顕微鏡は光線のかわりに電子線を用いる。電子線は波長が約0.05オングストロームと短いので、光学顕微鏡の解像力の限界を容易に超すことができる。電子顕微鏡の原理は、光学顕微鏡の原理とよく似ている。熱したフィラメントに加速電圧をかけると熱電子が陽極に向かって飛び出す。この電子線が陽極中央の穴を進み、電磁石でできている集光レンズを通り試料に当たる。試料を通過したのち、対物レンズと投射レンズにより屈折し、蛍光板上に拡大して像を結ぶ。試料内に密度の高い部分があると、電子線は散乱するので暗い像をつくる。暗く見える部分は、電子密度が高いという。厚い試料やバクテリアをまるごと観察するには、加速電圧の大きな超高圧電子顕微鏡が用いられる。これらの電子顕微鏡は透過型電子顕微鏡という。これに対して、細胞や物体の表面の立体構造を見るために開発されたのが走査型電子顕微鏡である。これは試料を電子線で走査したときに、試料から出る二次電子を検出し、ブラウン管上に走査し、明暗像をつくる。 [川島誠一郎] 生物顕微鏡の利用法生物顕微鏡は可視光線550ミリミクロンの波長で使用する光学顕微鏡で、対物レンズ(対物鏡)と接眼レンズ(接眼鏡)が鏡筒の上下についている。さらに標本を保持するステージ(載物台)と、標本を照明する照明系の集光器、絞り、反射鏡、光源(組み込まれた機種の場合)、焦点調整機構、鏡脚(ベース)、鏡柱(アーム)などからなる。生物顕微鏡は、大別すれば鏡筒上下動式とステージ上下動式の二つの型がある。どちらの型でも、もっとも重要な対物レンズは、4倍、10倍、20倍、40倍、60倍(以上乾燥系)、100倍(油浸系)が一般に用いられる。一方、対物レンズの像を拡大する接眼レンズには、5倍、10倍、15倍、20倍のものがある。 顕微鏡観察は、清潔で乾燥した、ほこりの少ない場所を選び、自然光を光源とする場合は北側の窓の太陽光線を用いるとよい。人工光源には蛍光灯などが適するが、付属の専用照明器具があればより効果的である。光源内蔵型はヨウ素光源が使用され、輝度も高く、優れている。 顕微鏡操作は次のような順序で行う。 (1)倍率を決める。初め低倍率のレンズで焦点をあわせ、必要によって高倍率に変える。鏡筒を高くあげて接眼レンズ、次に対物レンズを取り付ける。 (2)鏡筒を標準筒長に調整する(固定鏡筒はそのまま)。 (3)接眼レンズをのぞいて反射鏡を動かし、視野がもっとも明るく、明るさが一様になるようにする。 (4)ステージに標本をのせ、ステージの穴の中央にくるように固定する。 (5)焦点をあわせるときは、対物レンズと標本の距離を横から眺めながら対物レンズを近づけ、次に接眼レンズをのぞきながら粗動ハンドル、微動ハンドルを使って、正確に焦準をあわせる。 [林 武彦] 顕微鏡写真顕微鏡写真は、微細な構造の研究、検査、判別などで記録が必要な科学的、技術的分野で重要な役割を担っている。光学顕微鏡を用いた光学顕微鏡写真と電子顕微鏡を用いた電子顕微鏡写真があり、それぞれ、顕微鏡の種類、標本の種類、照明法などの違いで、生物顕微鏡写真、金属顕微鏡写真、走査顕微鏡写真などがある。 一般には一眼レフレックスカメラに専用のアダプターを用いて、比較的簡単に顕微鏡写真を撮ることができる。カメラはTTL式内蔵露出計の組み込まれているものが適している。さらに正確には、フィルム面測光TTLAE(ダイレクト測光)を利用すればよい。光源はスライド映写機か、付属の専用光源を利用する。いずれの場合も照明むらのないように顕微鏡との光軸合わせに注意が必要である。モノクロ(黒白)撮影は粒状性の細かいフィルムを使う。光源に緑色フィルターを利用すると好結果が得られる。カラー撮影は、リバーサルタイプ(スライド用)のフィルムを用いる場合、デイライト(昼光)用ではあらかじめ光源の明るさを決め、シャッター速度を変えて、色温度転換フィルター(ライトバランシングフィルター)のテストを行い、目的にあったものを選ぶ。タングステン光用は、双眼実体顕微鏡に落射斜照明法の光源でよく利用される。この場合も、光源の明るさを決めて、あらかじめシャッターテストを行い、適切なフィルターを選ぶようにする。標本は明暗のはっきりしたもの、平面性があること、カラーの場合は染色濃度のあるものが望ましい。顕微鏡写真はコントラストが少ないことをつねに念頭に置く必要がある。染色せずに撮影する生体標本(微生物など)は、動きを止めるくふうと顕微鏡の絞り方のくふうがたいせつである。カメラにモータードライブを装着するのも効果的である。 [林 武彦] 『坪井誠太郎著『偏光顕微鏡』(1959・岩波書店)』▽『田中克己著『顕微鏡の使い方』(1968・裳華房)』▽『八鹿寛二著『生物顕微鏡の基礎』(1973・培風館)』▽『井上勤監修・林武彦著『顕微鏡観察の基本〈顕微鏡観察シリーズ1〉』(1980・地人書館)』 [参照項目] | | | |顕微鏡は、焦点距離の短い対物レンズによって生じた物体の拡大像を、虫めがねのように働く接眼レンズによってさらに拡大して観察する©Shogakukan"> 顕微鏡の光路図 【照明の方向】〔透過照明〕 透明、半透明の標本を通過した光を観察する ―― 普通顕微鏡、偏光顕微鏡、紫外線顕微鏡、位相差顕微鏡、蛍光顕微鏡、干渉顕微鏡〔落射照明(斜照明を含む)〕 光を標本の上から照明し、反射してきた光を観察する。斜照明は生物顕微鏡で低倍率の場合に利用される ―― 金属顕微鏡、干渉顕微鏡、工具顕微鏡、斜照明生物顕微鏡(カバーガラスなしで全体標本などを撮影するとき)【照明の方法】〔明視野照明〕 透過光と落射光があり、中心を通る光を利用する ―― 一般の観察〔暗視野照明〕 照明光が直接対物レンズに入らず、標本に当たった散乱光だけで照明する ―― 細菌や微粒子の検鏡〔偏射照明〕 光束を一定の斜め方向からだけ照明する ―― 明視野照明で輪郭がとらえにくいときに用いる〔位相差照明〕 透明、無染色の生体標本の屈折率の差を干渉度の差に変化させて観察する ―― 透明標本などの観察©Shogakukan"> 顕微鏡の照明法による分類 出典 小学館 日本大百科全書(ニッポニカ)日本大百科全書(ニッポニカ)について 情報 | 凡例 |
>>: Keyboard instrument - Kenban Gakki (English spelling) keyboard instrument English
…Gallen Carrera, a leading figure in nationalist ...
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…[Kunihiko Ueda]. … *Some of the terminology that...
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